呕吐毒素免疫亲和柱

一、呕吐毒素免疫亲和柱产品用途：

可选择性吸附样品提取液中的玉米赤霉烯酮，从而对样品液中的玉米赤霉烯酮起到非常针对性的纯化作用，过柱纯化后的样品液纯度被提高，可用于不同分析方法的测定。

二、呕吐毒素免疫亲和柱产品概述：

玉米赤霉烯酮是由镰刀菌属的禾谷镰抱、黄色镰抱、木贼镰刀菌、谷丝核菌、半裸镰刀菌和镰抱菌产生的次级代谢物。玉米赤霉烯酮具有强大的雌激素效果、血液毒性和遗传毒性，主要污染玉米、小麦、大麦、燕麦和小米等。

三、反应原理：

玉米赤霉烯酮（ZEN）免疫层析亲和柱测定的原理是抗原抗体反应。玉米赤霉烯酮单克隆抗体固定于柱内凝胶上，样品中的玉米赤霉烯酮经过提取、过滤、稀释，然后缓慢通过玉米赤霉烯酮免疫亲和柱，在柱内玉米赤霉烯酮与抗体特异性结合，之后洗涤免疫亲和柱，除去未结合的其他物质。用甲醇洗脱玉米赤霉烯酮，注入到分析仪器中进行检测。

四、产品包装组成：

每盒中包含25支玉米赤霉烯酮免疫亲和柱及1套相应说明书。

• IAC性能：

1、性能参数

?2.交叉反应率

六、注意事项：

1、玉米赤霉烯酮对人体有害，应戴手套操作。

2、使用过的玻璃容器及玉米赤霉烯酮溶液用5%浓度的次氯酸钠溶液浸泡过夜。

3、不要使用过了有效日期的免疫亲和柱。

4、免疫亲和柱不使用时要2-8℃保存，不可冻存。

5、使用前，免疫亲和柱需回至室温（22-25℃）。

6、取样量：根据实际情况可以适当增减，但不可太少，同时提取液体积要按比例随之改变。

7、pH：上柱液pH要在6~8之间，若偏离此范围需用盐酸或氢氧化钠调节pH。

七、需要的材料但盒中不提供：

八、试剂配制：

1、提取液：甲醇-水（8:2）

移取800mL甲醇，加一级水200mL混合。

2、磷酸盐缓冲溶液（以下简称PBS）：称取8.00g氯化钠，1.20g磷酸氢二钠，0.20g磷酸二氢钾，0.20gkcl，用900mL蒸馏水溶解，然后用盐酸调节pH值至7.4，后用蒸馏水稀释定容至1000mL。

九、样品处理：真菌毒素分析的大误差来源是样品的收集和取样过程，所以要保证样品收集和取样的代表性。

（一）一般固体样品

1、称取5g试样（精确到0.01g）于50ml离心管中；

2、加20.0mL提取液，涡旋混匀，置于超声波/涡旋振荡器或摇床中振荡20min（或高速均质3min）；

3、在5000r/min下离心10min（或均质后用玻璃纤维滤纸过滤至澄清）；

4、取滤液4ml，加入24ml PBS混匀（如混浊，请用玻璃纤维滤纸过滤至澄清）

（二）植物油脂

1、称取5g试样（精确到0.01g）于50ml离心管中；

2、加20.0mL提取液，涡旋混匀，置于超声波/涡旋振荡器或摇床中振荡20min（或高速均质3min）；

3、5000r/min离心10min，取上清液备用；

4、取滤液4ml，加入24ml PBS溶液，混匀，（如混浊，请用玻璃纤维滤纸过滤至澄清）

（三）酱油、食醋

1、称取5g试样（精确到0.01g）于50ml离心管中；

2、用提取液定容至25ml（精确至0.1mL），涡旋混匀，置于超声波/涡旋振荡器或摇床中振荡20min（或高速均质3min）

3、在5000r/min下离心10min（或均质后用玻璃纤维滤纸过滤至澄清）；

4、取滤液4ml，加入，加入24ml PBS溶液，混匀（如混浊，请用玻璃纤维滤纸过滤至澄清）。

十、操作程序：符合国标GB 5009.209-2016

1、连接:将免疫亲和柱后盖取下，用剪刀剪开，重新盖上，连接于泵流操作架的30mL注射器下；

      2、上样:移取上述提取液移至注射器内，打开下端堵头；

      3、富集:将空气压力泵与注射器连接，调节压力使样品提取液缓慢通过免疫亲和柱，建议重力过柱；

      4、洗涤:用20mL蒸馏水分两次加压清洗，弃去全部流出液，并使2-3mL空气通过柱体；

      5、洗脱:为保证洗脱充分，以2.0mL色谱级甲醇进行洗脱，重力洗脱即可。首先，将免疫亲和柱内液体排干，加1.0mL甲醇于柱管内，重力过柱，当溶剂通过柱子后；再加入1.0mL甲醇重复上述洗脱步骤，后轻微加压排净洗脱液，合并洗脱液，将洗脱液浓缩吹干，用1mL流动相复溶，涡旋30s溶解残余物，0.22μm滤膜过滤，待测。

十一、操作流程图示

产品信息：

产品名称：玉米赤霉烯酮免疫亲和柱

产品货号：LD-002

产品描述：玉米赤霉烯酮单克隆抗体

包装单位：25支/盒

储存条件：2～8℃，切勿冷冻

保质期：  18个月

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